TintoFast Adipophilin Antibody Immunohistochemistry on a Frozen Acetone-fixed Squamous Cell Carcinoma Tissue
| 有可能的使用 | 用于莫氏體外診斷 | |||||||||||||||||||||||||||
| 總結(jié)與說(shuō)明 | 脂肪分化相關(guān)蛋白，也稱為 Perilipin 2 (PLIN2)、ADRP 或 Adipophilin，是一種在人體中由 ADFP 基因編碼的蛋白質(zhì)。親脂素與小球表面膜材料有關(guān)。這種蛋白質(zhì)是球表面的主要成分。mRNA水平的增加是脂肪細(xì)胞分化的最早跡象之一。Adipophilin 存在于多種培養(yǎng)的細(xì)胞系中，包括成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和上皮細(xì)胞。然而，在組織中，Adipophilin 的表達(dá)僅限于某些細(xì)胞類型，例如泌乳乳腺上皮細(xì)胞、腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞、男性生殖系統(tǒng)的支持細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞，以及酒精性肝硬化中的脂肪變性或脂肪變性肝細(xì)胞。 Adipophilin 抗體在各種皮脂腺病變和其他皮膚腫瘤中表達(dá)，細(xì)胞組織學(xué)清晰，可模擬皮脂腺分化。在評(píng)估具有透明細(xì)胞組織學(xué)的皮膚病變時(shí)，Adipophilin 在免疫組織化學(xué)小組中可能很有價(jià)值，因?yàn)樗梢宰R(shí)別皮脂腺和黃色瘤病變中的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)脂質(zhì)囊泡。在眼周病變中，當(dāng)考慮皮脂腺癌時(shí)，它有助于排除基底細(xì)胞癌和鱗狀細(xì)胞癌。Adipophilin 表達(dá)對(duì)于包括轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌在內(nèi)的鑒別診斷沒有那么有用，轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌是一種罕見但重要的診斷鑒別方法。觀察親脂素反應(yīng)性模式很重要，因?yàn)槟づ萑旧崾炯?xì)胞內(nèi)脂質(zhì)，而顆粒細(xì)胞質(zhì)反應(yīng)性則不然。Adipophilin 抗體適用于免疫染色，有助于鑒定皮脂腺病變中所見的胞漿內(nèi)脂質(zhì)。在具有挑戰(zhàn)性的病例（例如小眼周活檢標(biāo)本）中，它特別有助于識(shí)別低分化皮脂腺癌中的胞漿內(nèi)脂質(zhì)囊泡。 | |||||||||||||||||||||||||||
| 抗體類型 | 小鼠單克隆 | 克隆 | BSB-91 | |||||||||||||||||||||||||
| 同型 | IgG1 | 反應(yīng)性 | 石蠟，冷凍 | |||||||||||||||||||||||||
| 本土化 | 細(xì)胞質(zhì)的，膜的 | 控制 | 腎上腺、鱗狀細(xì)胞癌、移行細(xì)胞癌、皮脂腺腫瘤 | |||||||||||||||||||||||||
| 介紹 | TintoFast Adipophilin 是一種小鼠單克隆抗體，來(lái)源于細(xì)胞培養(yǎng)上清液，經(jīng)過(guò)濃縮、透析、過(guò)濾滅菌并在 pH 7.5 的緩沖液中稀釋，其中含有 BSA 和疊氮化納作為防腐劑。 | |||||||||||||||||||||||||||
| 可用性 |
| |||||||||||||||||||||||||||
莫氏冷凍組織的標(biāo)本制備
將標(biāo)本嵌入 OCT 中的低溫恒溫器內(nèi)。
在 4-5 µm 處切割切片并安裝在帶正電的載玻片上，例如 Bio SB Hydrophilic Plus 載玻片 (BSB 7028) 或 TintoDetector 蓋間隙載玻片 (BSB 7006) 的下三分之一處。
在室溫下風(fēng)干載玻片 2 分鐘，然后在培養(yǎng)箱或干浴中在 60°C 下孵育載玻片 3 分鐘。
在室溫下用丙酮固定 2 分鐘，然后讓載玻片風(fēng)干。
莫氏冷凍組織的預(yù)處理
將 TintoDetector 培養(yǎng)箱預(yù)熱至 110 °C。
將 TintoDetector Cap Gap 載玻片 (BSB 7006) 面對(duì)面放置，然后將它們插入 TintoDetector 載玻片支架 (BSB 7003)。
將載玻片浸入含 EDTA 的 ImmunoDNA Retriever 中，通過(guò)毛細(xì)作用提取足夠的溶液以覆蓋組織。
在預(yù)熱的 TintoDetector 培養(yǎng)箱中加熱載玻片 3 分鐘。
將載玻片轉(zhuǎn)移至室溫并冷卻 1 分鐘。
莫氏 IHC 檢測(cè)
HIER 后，將載玻片轉(zhuǎn)移到 ImmunoDNA 清洗機(jī)，靜置 1-2 分鐘。
對(duì)于手動(dòng)染色，在環(huán)境溫度下進(jìn)行抗體孵育。對(duì)于自動(dòng)染色方法，請(qǐng)根據(jù)儀器制造商的說(shuō)明進(jìn)行抗體孵育。
用 ImmunoDNA 洗滌器或去離子水清洗載玻片。
繼續(xù) IHC 檢測(cè)協(xié)議。用 ImmunoDNA 洗滌液在每個(gè)步驟之間清洗載玻片。
HRP Green 免疫組化方案的縮寫 Mohs PolyDetector Plus DAB HRP Brown
與一抗孵育 5 分鐘
用緩沖液（TBST 或 PBST）清洗
用 M/R 鏈接孵育 4 分鐘
用緩沖液（TBST 或 PBST）清洗
HRP 標(biāo)簽 4 分鐘。
用緩沖液（TBST 或 PBST）清洗
準(zhǔn)備
DAB Brown（在 1ml DAB 緩沖液中加入 1 滴 DAB Chromogen；充分混合）
或 HRP Green（在 1 ml HRP Green Buffer 中加入 1 滴 HRP Green Chromogen；充分混合）
用 DAB 或 HRP Green 孵育 1-2 分鐘
用緩沖液（TBST 或 PBST）清洗
用蘇木精或核固紅復(fù)染 30 秒
用緩沖液（TBST 或 PBST）清洗
使用 AquaMounter 安裝或使用 Fast ChromoProtector 使組織脫水，然后使用 PermaMounter 安裝
| 步 | Mohs PolyDetector HRP Green 或 DAB 20 分鐘協(xié)議 |
| 希爾 | 3 分鐘。 |
| 一抗 | 5分鐘。 |
| 第一步檢測(cè) | 4分鐘。 |
| 第二步檢測(cè) | 4分鐘。 |
| 底物色原 | 1-2 分鐘。 |
| 復(fù)染/蓋玻片 | 變化 |
此協(xié)議也可用于使用檸檬酸鹽或 EDTA 檢索的 FFPE 組織。
