hti熒光底物簡(jiǎn)介

haemtech基于 ANSN 的熒光底物
的一般結(jié)構(gòu)圖解了基于6-氨基-1-萘磺酰胺 (ANSN) 熒光底物的一般結(jié)構(gòu)。在本族化合物中，R1是COOH-末端殘基通常是精氨酸的三肽。R2和R3可以是氫、烷基、芳基或環(huán)烷基。虛線表示各種絲氨酸蛋白酶水解的位點(diǎn)。

含有熒光報(bào)告基團(tuán) 6-amino-1-naphthalene-sulfonamide (ANSN) 的底物是監(jiān)測(cè)各種絲氨酸蛋白酶的酶活性的有用化合物 (1-12)。在此類化合物中，ANSN 報(bào)告基團(tuán)與短的三肽序列相連（在 R1 位置）。肽序列旨在優(yōu)化酶和底物之間的相互作用?？梢蕴砑拥?R2 和 R3 位置的其他成分反映了 P' 亞位點(diǎn)位置的變化，并且通常會(huì)影響底物的動(dòng)力學(xué)參數(shù)。作為有效底物的化合物在三肽和 ANSN 基團(tuán)之間水解。一旦從肽部分切下，ANSN 基團(tuán)的相對(duì)熒光就會(huì)增加約 1000 倍。

下頁(yè)確定的動(dòng)力學(xué)特性將有助于選擇合適的底物。已證明 ANSN 底物對(duì)因子 VIIa (1-5,7,9,10,12) 的分析特別有用。盡管單獨(dú)的因子 VIIa 的底物水解速率相對(duì)較慢，但當(dāng)組織因子加入分析系統(tǒng)時(shí)，幾種化合物（例如化合物 SN-17a）的 kcat 會(huì)發(fā)生很大變化。

使用信息：
基于 ANSN 的底物以 DMSO 中的 10 mM 儲(chǔ)備溶液形式提供，通?？捎糜诜治?400 nM 至低至 50pM 濃度范圍內(nèi)的酶。ANSN 底物通常以 50 到 100 µM 的最終濃度使用，并且可以在大多數(shù)生理緩沖液（即 TBS、HBS、PBS 等）中稀釋到該最終濃度。反應(yīng)（熒光的相對(duì)變化）可以使用標(biāo)準(zhǔn)熒光計(jì)或熒光讀板器進(jìn)行監(jiān)測(cè)。動(dòng)力學(xué)或終點(diǎn)模式可與設(shè)置在以下波長(zhǎng)（激發(fā)=352nm，發(fā)射=470nm）的儀器一起使用。通過(guò)在發(fā)射光束中使用 390 到 450 nm 長(zhǎng)通截止濾波器，可以最大限度地減少光偽影。

下表列出了每種底物的動(dòng)力學(xué)特性，表下方列出了期刊參考文獻(xiàn)列表以作為使用示例。

DMSO 中的儲(chǔ)備底物溶液應(yīng)在 4°C 或更低的溫度下冷凍儲(chǔ)存，并應(yīng)避光。在這些條件下，化合物將保持穩(wěn)定超過(guò)一年。

**下表的關(guān)鍵字：K m = µM；k貓= s -1 ; k cat /K m = M -1 s -1 x 10 -5 ; ND=未確定

•  SN-5 6-amino-1-naphthalenesulfonamide-based (ANSN) 熒光底物價(jià)格：請(qǐng)?jiān)儍r(jià)

   

  結(jié)構(gòu)	D-AFK-ANSNH-iC 4 H 9 .2HBr
  對(duì)...有用	對(duì)纖溶酶有用

  公式	DMSO
  專注	10 毫米

  動(dòng)力學(xué)特性	Ⅱa	VIIa	VIIa/TF	Xa	夏	個(gè)人電腦	多巴胺	纖溶酶
  ?中號(hào)	ND	ND	ND	ND	ND	ND	ND	130
  K貓	ND	ND	ND	ND	ND	ND	ND	3.7
  K貓/K M	ND	ND	ND	ND	ND	ND	ND	0.28

•  SN-7 6-amino-1-naphthalenesulfonamide-based (ANSN) 熒光底物價(jià)格：請(qǐng)?jiān)儍r(jià)

  
  

  結(jié)構(gòu)	Mes-D-LGR-ANSN(C 2 H 5 ) 2
  對(duì)...有用	對(duì)因子 Xa 有用

  公式	DMSO
  專注	10 毫米

  動(dòng)力學(xué)特性	Ⅱa	VIIa	VIIa/TF	Xa	夏	個(gè)人電腦	多巴胺	纖溶酶
  ?中號(hào)	31	180	200	125	580	113	ND	ND
  K貓	0.63	0.007	0.79	36	15	0.055	ND	ND
  K貓/K M	0.2	ND	0.04	2.9	0.26	0.005	ND	ND

•  SN-13a 6-amino-1-naphthalenesulfonamide-based (ANSN) 熒光底物價(jià)格：請(qǐng)?jiān)儍r(jià)

  
  

  結(jié)構(gòu)	D-LPR-ANSNH-C 3 H 7 • 2 HCl
  對(duì)...有用	對(duì)因子 XIa 有用

  公式	DMSO
  專注	10 毫米

  動(dòng)力學(xué)特性	Ⅱa	VIIa	VIIa/TF	Xa	夏	個(gè)人電腦	多巴胺	纖溶酶
  ?中號(hào)	0.5	300	300	171	75	45	98	ND
  K貓	19	0.07	4.5	3.3	53	52	0.31	ND
  K貓/K M	380	0.002	0.15	0.19	7.1	12	0.03	ND

•  SN-17a 6-amino-1-naphthalenesulfonamide-based (ANSN) 熒光底物價(jià)格：請(qǐng)?jiān)儍r(jià)

  
  

  結(jié)構(gòu)	D-FPR-ANSNH-C 6 H 11 • 2 HCl
  對(duì)...有用	對(duì)凝血酶和 VIIa 有用

  公式	DMSO
  專注	10 毫米

  動(dòng)力學(xué)特性	Ⅱa	VIIa	VIIa/TF	Xa	夏	個(gè)人電腦	多巴胺	纖溶酶
  ?中號(hào)	0.4	150	330	150	ND	7.8	36	ND
  K貓	17	0.05	8.4	0.32	ND	6.6	0.074	ND
  K貓/K M	430	0.004	0.25	0.02	ND	8.6	0.02	ND

•  SN-17c 6-amino-1-naphthalenesulfonamide-based (ANSN) 熒光底物價(jià)格：請(qǐng)?jiān)儍r(jià)

  
  

  結(jié)構(gòu)	D-FPR-ANSNH-C 4 H 9 • 2 HCl
  對(duì)...有用	對(duì)因子 VIIa 有用

  公式	DMSO
  專注	10 毫米

  動(dòng)力學(xué)特性	Ⅱa	VIIa	VIIa/TF	Xa	夏	個(gè)人電腦	多巴胺	纖溶酶
  ?中號(hào)	ND	186	102	ND	ND	53	ND	ND
  K貓	ND	0.11	2.7	ND	ND	21	ND	ND
  K貓/K M	ND	0.006	0.26	ND	ND	4	ND	ND

•  SN-18 6-amino-1-naphthalenesulfonamide-based (ANSN) 熒光底物價(jià)格：請(qǐng)?jiān)儍r(jià)

  
  

  結(jié)構(gòu)	Boc-L-(pF)FPR-ANSNH-C 2 H 5
  對(duì)...有用	對(duì) tPA 有用

  公式	DMSO
  專注	10 毫米

  動(dòng)力學(xué)特性	Ⅱa	VIIa	VIIa/TF	Xa	夏	個(gè)人電腦	多巴胺	纖溶酶
  ?中號(hào)	3.7	50	217	ND	ND	ND	71	ND
  K貓	44	0.008	0.88	ND	ND	ND	1.03	ND
  K貓/K M	120	0.002	0.04	ND	ND	ND	0.15	ND

•  SN-20 6-amino-1-naphthalenesulfonamide-based (ANSN) 熒光底物價(jià)格：請(qǐng)?jiān)儍r(jià)

  
  

  結(jié)構(gòu)	Boc-L-FPR-ANSNH-C 2 H 5
  對(duì)...有用	對(duì)凝血酶有用

  公式	DMSO
  專注	10 毫米

  動(dòng)力學(xué)特性	Ⅱa	VIIa	VIIa/TF	Xa	夏	個(gè)人電腦	多巴胺	纖溶酶
  ?中號(hào)	17	ND	ND	100	ND	540	47	ND
  K貓	58	ND	ND	0.31	ND	2.2	0.011	ND
  K貓/K M	34	ND	ND	0.003	ND	0.04	0.002	ND

•  SN-45 6-amino-1-naphthalenesulfonamide-based (ANSN) 熒光底物價(jià)格：請(qǐng)?jiān)儍r(jià)

  
  

  結(jié)構(gòu)	L-EGR-ANSNH-C 3 H 7 • 2 HBr
  對(duì)...有用	對(duì)因子 XIa 有用

  公式	DMSO
  專注	10 毫米

  動(dòng)力學(xué)特性	Ⅱa	VIIa	VIIa/TF	Xa	夏	個(gè)人電腦	多巴胺	纖溶酶
  ?中號(hào)	100	ND	ND	110	225	440	ND	ND
  K貓	2.5	ND	ND	0.2	82	17	ND	ND
  K貓/K M	0.25	ND	ND	0.02	3.6	0.39	ND	ND

•  SN-54 6-amino-1-naphthalenesulfonamide-based (ANSN) 熒光底物價(jià)格：請(qǐng)?jiān)儍r(jià)

  
  

  結(jié)構(gòu)	BOC-D-VLR-ANSNH-C 4 H 9
  對(duì)...有用	對(duì) aPC 有用

  公式	DMSO
  專注	10 毫米

  動(dòng)力學(xué)特性	Ⅱa	VIIa	VIIa/TF	Xa	夏	個(gè)人電腦	多巴胺	纖溶酶
  ?中號(hào)	19	42	170	19	ND	3.9	ND	ND
  K貓	0.055	0.007	1.6	0.055	ND	2.1	ND	ND
  K貓/K M	0.03	0.002	0.09	0.03	ND	5.2	ND	ND

•  SN-59 6-amino-1-naphthalenesulfonamide-based (ANSN) 熒光底物價(jià)格：請(qǐng)?jiān)儍r(jià)

  
  

  結(jié)構(gòu)	D-VPR-ANSNH-C 4 H 9 • 2 HCl
  對(duì)...有用	對(duì)凝血酶和 aPC 有用

  公式	DMSO
  專注	10 毫米

  動(dòng)力學(xué)特性	Ⅱa	VIIa	VIIa/TF	Xa	夏	個(gè)人電腦	多巴胺	纖溶酶
  ?中號(hào)	2	89	52	160	520	54	110	ND
  K貓	110	0.019	0.76	3.3	92	72	0.71	ND
  K貓/K M	550	0.002	0.14	0.21	1.8	13	0.065	ND